通常為了完成實驗,細胞鋪展是很常見的。但很多人都不是很會用,而且分布不均,要么中間密而周圍稀疏,要么周圍密而中間禿。因此接下來就來為大家介紹一下96孔板鋪展細胞的主要流程,希望能夠對大家有所幫助。
1、一般96孔板每孔加入100微升細胞懸液。從靠近底部的孔的左側進行添加一些細胞懸浮液。加半杯后,攪拌細胞懸液,不要加,繼續加剩下的半杯。添加完公司所有設計板子后,蓋上板子,左手可以輕輕抓住這個板子的左側,右手輕輕敲擊板子的右邊緣。如果太強或次數太多,細胞就會集中和積累。順時針轉動盤子,將剩下的三邊需要一個接一個學生敲擊,靜置約5分鐘,然后可以放入37度的培養箱中。
2、加入細胞懸浮液后,打開細胞培養板,從底部向上觀察光線,看看細胞是否聚集。然后按底部進行超頻。
3、如果實驗室有搖板機,建議使用本儀器輕輕搖晃。效果好,就是一個幅度小,頻率高。
4、細胞要盡量分散,大部分處于單一狀態。離心后,停止。六孔墊上的一些齒輪在晃動。搖動時,不要讓細胞液流下來,否則所有細胞都會向中心移動,不均勻。
5、當小瓶細胞裝滿后,繼續進行正常數據處理。將其均勻地吹入培養瓶中,然后以每孔 2 ml 分配到 6 孔板中。涂抹后不需要進行觀察,用酒精棉擦拭。 然后放入培養箱進行分別朝著左右后轉三圈,一般是24小時后,每個孔的細胞都非常均勻。
6、計算所需的所有液體和細胞計數,混合均勻并添加到 6 孔板中。六孔板呈八字形水平擺動。在顯微鏡下觀察。如果出現不均勻,如上所述可以再次進行搖晃。如果未直接計數或接種細胞,請在接種 6 孔板期間隨時搖動混合瓶。
7、先對96孔板進行上下移動,然后沿水平板進行左右移動,每個發展方向5-6次,但主要是通過晃動后直接可以放入培養箱,不要做學生太多晃動,否則很容易再次進入中間將其重新組合在一起。