您是怎樣對羅氏480適配96孔pcr板進行鋪板的?你在用什么方法?當細胞用羅氏480適配96孔pcr板接種時,細胞經常是不均勻分布。第二天,一些地方顯示積累增長,而在許多地方,細胞稀疏,細胞和細胞之間的細胞密集,接觸抑制會影響細胞的生長,因此很難評估干預因素對細胞的影響。
1、老方法:種植板后,用手提起96孔板,搖動幾次,然后來回搖動幾次。但是,5個重復孔中總共有2-3個孔。在大多數情況下,均勻分布在洞中間的一堆分布,這已經讓人煩惱了一段時間。再一次,看到一位老師將電路板放在振動器上并搖動幾分鐘。結果更糟,細胞都跑到了中間。
通常96孔板I每孔加入100微升細胞懸液,從孔的左側添加到底部,加入半側板,混合未填充的細胞懸浮液,并繼續添加剩余的一半板,添加關閉后,蓋上蓋子,用左手輕輕握住電路板的左側,然后用右手輕輕敲擊電路板的右邊緣。注意力量(通常輕輕拍三次)。太強或太多次都會導致細胞堆積成堆。順時針旋轉板(逆時針效果不好),依次點擊剩余的三個側面,靜置約5分鐘,然后放入37度的培養箱中。
2、新方法:種類很均勻。先使用移液管吸取均勻吹制的細胞,然后將端靠在孔的一側(注意端不接觸孔的底部),然后慢慢戳端的細胞。種植后,不要搖晃板,只需將其放在顯微鏡下觀察即可,這種方法可以說是100%有效的。
補充:從6孔板到96孔板,細胞應均勻分散。先,用培養基稀釋細胞,然后將平板放在適當的位置。添加細胞并添加細胞時,請勿移動平板;如果在空氣中沒有介質吹入,但不要移動板,添加細胞,靜置20-30分鐘,然后轉移到培養箱。因此,細胞通常非常長且均勻。當然,提是細胞被很好地消化。
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